Principio del medidor de clorofila

Principio del medidor de clorofila

De acuerdo con la absorción del espectro visible por el extracto de pigmento cloroplástico, la absorbancia se mide a una longitud de onda específica mediante un espectrofotómetro, y el contenido de cada pigmento en el extracto puede calcularse mediante la fórmula. De acuerdo con la ley de Lambert-Beer, la absorbancia A de una solución coloreada es proporcional a la concentración de solutos C y al espesor L de la capa líquida, es decir, A = αCL: α constante proporcional.

Cuando la concentración de la solución está en unidades de concentración porcentual y el grosor de la capa líquida es de 1 cm, α es el coeficiente de absorción de la sustancia. El coeficiente de absorción de varias soluciones de sustancias coloreadas a diferentes longitudes de onda puede obtenerse midiendo la absorbancia de sustancias puras en longitudes de onda conocidas a diferentes longitudes de onda.

Si hay varios tipos de sustancias absorbentes de luz en la solución, la absorbancia total del líquido mezclado a una cierta longitud de onda es igual a la absorbancia completa de cada componente en la longitud de onda correspondiente. Esta es la aditividad de la absorbancia. Para determinar el contenido de clorofila a, b y carotenoides en el extracto de pigmento del cloroplasto, solo es necesario determinar la absorbancia A del extracto a tres longitudes de onda específicas, y de acuerdo con la clorofila a, b y los carotenoides a esta longitud de onda. El coeficiente de absorbancia se puede usar para determinar la concentración. Para eliminar la interferencia de los carotenoides al medir la clorofila a y b, la longitud de onda de la luz monocromática utilizada selecciona el máximo pico de absorción de la clorofila en la región roja.

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